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PCR-RFLP e genotipagem de echinococcus granulosus
| dc.contributor.author | Beato, Sílvia | |
| dc.contributor.author | Calado, Manuela | |
| dc.contributor.author | Clemente, Isabel | |
| dc.contributor.author | Grácio, Maria Amélia | |
| dc.date.accessioned | 2011-05-13T14:23:36Z | |
| dc.date.available | 2011-05-13T14:23:36Z | |
| dc.date.issued | 2009 | |
| dc.description.abstract | A hidatidose é uma zoonose, causada pelo helminta Echinococcus granulosus, presente de um modo geral, em todo o globo terrestre tendo na região mediterrânica uma elevada importância. Estão descritos, para esta espécie, 10 genótipos (G1 a G10) em saúde pública ligados a diferentes hospedeiros intermediários. Das técnicas de biologia molecular utilizadas para a genotipagem do E. granulosus, umas mostraram-se mais específicas e sensíveis que outras. Assim, neste estudo, pretende-se avaliar a PCR-RFLP na genotipagem de amostras de E. granulosus provenientes de Portugal. MATERIAL E MÉTODOS Foram obtidos 30 quistos hidáticos de ovinos e bovinos parasitados com E. granulosus e procedeu-se à extracção da areia hidática contida nos quistos. Foi extraído o DNA do parasita a partir da areia hidática e amplificada a região ITS-1 com três pares de “primers” diferentes (Eg16-PCR, Eg9-PCR e ITS-1-PCR). Foram aplicadas enzimas de restrição (Alu I, Cfo I, Msp I e Rsa I) a estes produtos de amplificação, os quais foram visualizados em electroforese em gel de agarose a 2,5%. Foi ainda amplificado o gene citocromo oxidase sub-unidade I (COI) e sequenciado. As sequências obtidas foram comparadas com algumas existentes no GenBank. RESULTADOS Foram obtidos produtos de amplificação para as reacções Eg16-PCR, Eg9-PCR e ITS-1-PCR. A eficiência de reacção foi de 100% para as primeiras duas PCR e cerca de 60% para a ITS-1-PCR. Foram obtidos diferentes padrões de corte, no produto amplificado, consoante a enzima usada. CONCLUSÕES Foram encontradas algumas divergências no padrão de corte com a mesma enzima, tendo sido essas amostras amplificadas para o gene COI e sequenciadas para determinar o genótipo em questão. Verificou-se, em todas as amostras que suscitaram dúvidas com a aplicação das enzimas de restrição, que se estava perante o genótipo G1. Assim, podemos concluir que para a genotipagem da espécie E. granulosus é necessário associar à técnica PCR-RFLP uma técnica mais específica, o que está de acordo com o mencionado por Villalobos et al. (2007) e Manterola et al. (2008) | por |
| dc.identifier.citation | BEATO, Sílvia [et al.] (2009) - PCR-RFLP e genotipagem de echinococcus granulosus. In Congresso Ibérico de Parasitologia, 11, Lisboa, 15-18 Setembro. Lisboa: Sociedade Portuguesa de Parasitologia | por |
| dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/10400.11/636 | |
| dc.language.iso | por | por |
| dc.subject | PCR-RFLP | por |
| dc.subject | Echinococcus | por |
| dc.subject | Genotipagem | por |
| dc.subject | Portugal | por |
| dc.subject | Estirpe G1 | por |
| dc.title | PCR-RFLP e genotipagem de echinococcus granulosus | por |
| dc.type | conference object | |
| dspace.entity.type | Publication | |
| oaire.citation.conferencePlace | Lisboa | por |
| oaire.citation.title | XI Congresso Ibérico de Parasitologia | por |
| rcaap.rights | openAccess | por |
| rcaap.type | conferenceObject | por |