Publication
Qual o melhor método de extracção de DNA de echinococcus granulosus?
| dc.contributor.author | Roque, Cláudio André Martins | |
| dc.contributor.author | Beato, Sílvia | |
| dc.contributor.author | Parreira, Ricardo | |
| dc.contributor.author | Belo, João | |
| dc.contributor.author | Grácio, Maria Amélia | |
| dc.date.accessioned | 2014-04-03T15:44:21Z | |
| dc.date.available | 2014-04-03T15:44:21Z | |
| dc.date.issued | 2011 | |
| dc.description.abstract | O céstode E. granulosus, agente causal da hidatidose/equinococose, está presente em diversas espécies de animais e, acidentalmente, em humanos. Este apresenta uma grande variabilidade genética, com dez genótipos diferentes descritos (G1 – G10), onde alguns destes já são considerados novas espécies. Estes genótipos encontram-se distribuídos um pouco por todo o mundo, inclusive Portugal. O presente trabalho teve como objectivo comparar diferentes métodos de extracção de DNA para E. granulosus, para optimização das técnicas de PCR utilizadas na sua caracterização molecular. Procedeu-se à extracção de DNA de 20 amostras usando 3 kits comerciais, “High pure PCR template preparation kit”, “Easy spin kit”, “QIAamp DNA mini kit” e a extracção manual de fenol-clorofórmio (Sambrook, 1989), com algumas modificações. Posteriormente, foi efectuada a quantificação do DNA extraído, do grau de pureza e da quantidade de sais por densidade óptica (DO) a 230nm, 260nm e 280nm (GeneQuant, BIORAD). Foi também tido em conta o tempo que demora cada extracção e o seu custo. Para de facto termos a certeza que se tratava de E.granulosus, efectuou-se a amplificação do gene mitocondrial ND1, recorrendo aos primers JB11, JB12 . Os resultados obtidos provam que o melhor método para a extracção de DNA de E.granulosus é o método manual fenol-clorofórmio (modificado) e que se tratava de E.granulosus, visto que ocorreu amplificação com os primers JB11 e JB12. | por |
| dc.identifier.citation | ROQUE, Cláudio [et al.] (2011) - Qual o melhor método de extracção de DNA de echinococcus granulosus?. In Congresso Internacional de Análises Clínicas e de Saúde Pública da Escola Superior de Saúde Dr. Lopes Dias, 1, Castelo Branco, fevereiro. | por |
| dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/10400.11/2341 | |
| dc.language.iso | por | por |
| dc.subject | Echinococcus granulosus | por |
| dc.subject | Extração de DNA | por |
| dc.subject | PCR | por |
| dc.subject | Quantificação de DNA | por |
| dc.subject | Comparação de métodos de extracção de DNA | por |
| dc.title | Qual o melhor método de extracção de DNA de echinococcus granulosus? | por |
| dc.type | conference object | |
| dspace.entity.type | Publication | |
| oaire.citation.conferencePlace | Castelo Branco | por |
| oaire.citation.title | I congresso Internacional de Análises Clínicas e de Saúde Pública da Escola Superior de Saúde Dr. Lopes Dias | por |
| person.familyName | de Morais de Oliveira Belo | |
| person.givenName | João Luis | |
| person.identifier.ciencia-id | DE1B-DF40-D472 | |
| person.identifier.orcid | 0000-0003-4671-4239 | |
| rcaap.rights | openAccess | por |
| rcaap.type | conferenceObject | por |
| relation.isAuthorOfPublication | 1dd09b74-6d78-4597-9a1d-15e34eca6baf | |
| relation.isAuthorOfPublication.latestForDiscovery | 1dd09b74-6d78-4597-9a1d-15e34eca6baf |