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CaracterizaĆ§Ć£o molecular de Listeria monocytogenes ser. 4b por Amplified Fragment Length Polymorphism "AFLP"
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Authors
Abstract(s)
O serotipo maioritariamente associado Ć s estirpes de Listeria monocytogenes isoladas de queijos Portugueses pertence ao serotipo 4b, o qual estĆ” referido na literatura como o responsĆ”vel pelo maior nĆŗmero de casos de listeriose humana. Tendo em conta a importĆ¢ncia de que se revestem estas estirpes, a sua caracterizaĆ§Ć£o usando mĆ©todos mais discriminatĆ³rios que a serotipagem Ć© de crucial importĆ¢ncia. Assim, o presente estudo teve por finalidade a caracterizaĆ§Ć£o molecular de estirpes de L. monocytogenes ser. 4b, isoladas de queijos de diferentes zonas do paĆs, e uma primeira avaliaĆ§Ć£o da distribuiĆ§Ć£o geogrĆ”fica dos tipos moleculares encontrados.
Foi usado o mĆ©todo Amplified Fragment Length Polymorphism (AFLP) com base no protocolo que se encontra em funcionamento no Health Protection Agency Department of Gastrointestinal Infections / Centre for Infections, em Londres. Para a anĆ”lise da similaridade entre estirpes recorreu-se ao programa Bionumerics. O poder discriminatĆ³rio do mĆ©todo AFLP foi calculado atravĆ©s do Ćndice de diversidade de Simpson.
Das 47 estirpes de L. monocytogenes ser. 4b tipadas neste trabalho resultaram 6 perfis diferentes com um nĆŗmero de bandas compreendido entre 5 a 7 no intervalo entre 500 bp e 1500 bp. Todos os perfis AFLP apresentaram uma banda comum de aproximadamente 850 bp. O poder discriminatĆ³rio do mĆ©todo AFLP foi avaliado em 0,70. Pela anĆ”lise do dendrograma observou-se a existĆŖncia de 6 clusters para uma percentagem de similaridade de 98%, os quais foram agrupados de acordo com o tipo AFLP previamente atribuĆdo. A relaĆ§Ć£o de similaridade mais afastada encontrada entre os 47 isolados foi de 67%. Considerando a totalidade dos isolados provenientes da regiĆ£o da Serra da Estrela, foi possĆvel identificar 5 tipos AFLP, quatro dos quais identificados apenas naquela zona e um quinto tipo AFLP com uma distribuiĆ§Ć£o geogrĆ”fica alargada (Serra da Estrela, Serpa e SĆ£o Jorge), o que contraria a sua utilizaĆ§Ć£o como marcador geogrĆ”fico. Comparando estes 47 perfis com os obtidos anteriormente pelo mesmo mĆ©todo usando isolados provenientes das zonas produtoras de queijo de Castelo Branco e Tolosa (n=61), conclui-se que os tipos AFLP obtidos sĆ£o diferentes, nĆ£o havendo tipos AFLP comuns entre as zonas de Tolosa, Castelo Branco e Serra da Estrela, indicando uma associaĆ§Ć£o entre um determinado tipo AFLP de L. monocytogenes ser. 4b e cada uma destas regiƵes.
Description
DissertaĆ§Ć£o do Mestrado em Engenharia ZootĆ©cnica, ministrado em colaboraĆ§Ć£o pela Universidade dos AƧores e pela Escola Superior AgrĆ”ria do Instituto PolitĆ©cnico de Castelo Branco.
Keywords
Listeria monocytogenes Tipagem por AFLP Marcador geogrƔfico Queijo
Pedagogical Context
Citation
GOULĆO, Maria Manuela Martins Francisco (2010) - CaracterizaĆ§Ć£o molecular de Listeria monocytogenes ser. 4b por Amplified Fragment Length Polymorphism "AFLP". Angra do HeroĆsmo : Universidade dos AƧores. 125 p. : quadros, grĆ”ficos. DissertaĆ§Ć£o de Mestrado.